呼吸道病原体八项检测的临床介绍
急性呼吸道疾病(acuterespiratorydisease,ARD)在发达国家急性病中发生率占75%,其中约80%是病毒引起。呼吸道病原体IgM检测为急性呼吸道疾病病原体筛查提供及时、有效的实验室依据,对临床诊断和合理使用抗生素起到指导作用。
一、检测原理
采用间接免疫荧光技术检测八种常见呼吸道病原体的IgM抗体。主要包括肺炎支原体、嗜肺军团菌、呼吸道合胞病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒、腺病毒和肺炎衣原体。荧光显微镜下各类呼吸道病原体阳性结果见图1。
二、各项检测的临床意义
1、呼吸道合胞病毒(RSV)
呼吸道合胞病毒是一种RNA病毒,侵犯上呼吸道的上皮组织,引起坏死性炎症,这可导致严重的支气管炎和肺炎,尤其在母乳喂养婴儿和低龄儿童中。它是主要的流感病毒之一,部分地区性的呼吸道病原体流调显示,RSV的阳性率能达到11.58%-36%。该病传染性强,在人群中的感染率很高,大约90%的成人感染过。虽然感染RSV后可产生具有中和作用和补体结合能力的抗体,但是再次感染仍很常见。抗呼吸道合胞病毒特异性IgM抗体最早可在发病1周左右出现,可持续存在2-3个月。
2、腺病毒
腺病毒可引起多种临床疾病,世界上6%的呼吸道感染是由腺病毒所引起的。腺病毒可通过气溶胶或物在人与人之间传播。在感染后的最初几天中,排泄物中的病毒含量最高。抗腺病毒特异IgM抗体最早出现在发病后1周左右,可持续存在2-3个月。
3、肺炎衣原体
年,肺炎衣原体成为继沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体之后发现的第三个衣原体。肺炎衣原体为人类致病原,通过气溶胶传播。有10%的感染性肺炎是由肺炎衣原体所致。肺炎衣原体的感染遍及全世界,在50%的成人中可检出抗肺炎衣原体抗体。血清转化最常见于5到15年龄段,20岁时免疫力达到高峰。约一半的肺炎衣原体感染无临床症状。肺炎衣原体感染最常见的临床症状为轻微的呼吸道感染。典型的症状为持续性干咳,也可出现咽喉疼痛、头疼和发热。大约10%的感染者发展成肺炎。与肺炎衣原体有关的慢性病有支气管哮喘和动脉粥样硬化。另外,肺炎衣原体感染与冠心病的发病机理的关系正在研究中。通常在初次感染肺炎衣原体2-3周后出现IgM抗体,并可持续存在2-6个月。在出现IgM抗体后的3-5周患者体内的IgG抗体水平明显升高,这意味着抗肺炎衣原体抗体检出时间要迟于许多其他感染。复发感染1-2周后,患者体内的IgG抗体水平升高,但是,有些患者不出现IgG水平升高。复发感染时,可见IgM抗体水平轻微升高。无论是肺炎衣原体感染细胞作为检测基质的间接免疫荧光法还是以原生小体作为检测基质的微量免疫荧光法(MIF)检测肺炎衣原体抗体,都不能排除其与沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体之间的交叉反应。
4、流感病毒A/B
流感主要在寒冷的季节流行,潜伏期为1-5天。流感病毒属于正粘病毒,分成A、B和C三型。病毒衣壳糖蛋白是流行病学相关的主要抗原。在A和B型中,此抗原为血液凝集素和神经氨酸酶。由于流感病毒的基因变异能力很强,因而一次流感病毒感染不会产生终生免疫。对于高危人群(免疫力比较弱的人群或老人),可在流感流行季节开始时用相关的病毒株进行免疫,但这也只对所使用的亚型具有保护作用。抗流感特异的IgM抗体最早可在发病1周左右出现,可持续存在2-3个月。
5、嗜肺军团菌
嗜肺军团菌是一种胞内兼性短杆菌。嗜肺军团菌可攻击肥大细胞并在其内繁殖,但是,到目
前为止,尚未完全了解其致病机制。军团菌感染首次于年在美国发现,大约名参加费城美国军队会议的退伍军人中有人发病,表现为由嗜肺军团菌感染所引起的多源性、坏死性肺炎(军团菌病),累及肺部及其它器官:如中枢神经系统、肾脏或肝脏。免疫力低下或心肺功能障碍的患者特别易感,致死率可高达20%。军团菌主要通过气溶胶传播,医院中的冷热水系统、冷却塔和空调设备中的加湿器以及漩涡浴室均可成为传染源。嗜肺军团菌性肺炎可在世界范围偶发或流行。嗜肺军团菌也可导致一种非常罕见的非肺炎自限性疾病――庞提雅克热。嗜肺军团菌血清型1为最为常见的感染人类的嗜肺军团菌,但也有各种军团菌属的混合感染。偶尔,嗜肺军团菌可与其它军团菌、拟杆菌属、鹦鹉热衣原体、肺炎支原体和假单胞菌属发生交叉反应。细菌培养是检测嗜肺军团菌的金标准,但仅30%感染者的检测结果为阳性。为此,血清学指标在诊断中起到重要的作用。间接免疫荧光法是检测抗嗜肺军团菌抗体的标准方法。抗嗜肺军团菌特异的IgM抗体最早可在感染1周后出现,可持续存在3-6月。
6、肺炎支原体
支原体是目前已知的一种最小的可自我复制的细胞,不含坚硬的细胞壁(胞壁质缺陷),因而作用于细胞壁的抗生素对其基本没有疗效。目前人类中已发现了12种支原体属。肺炎支原体可引起非典型性肺炎和常见的上呼吸道感染。感染可通过汽溶胶引起,人类是该病原体的唯一宿主。急性感染(间质性肺炎或长期的气管支气管炎)常见于5到15岁的年轻人中。人与人之间密切的接触可加速支原体的传播。感染后经过10-20天的潜伏期后,可出现持续性的咳嗽、发热和头痛等症状。另外,在一些病例中还可出现咽喉炎和中度的耳部疾病,但大部分的感染无任何症状。也可发生再次感染。组织学研究发现:肺炎支原体可粘附于气管、支气管和细支气管的上皮细胞上。如果是肺炎支原体感染,由表面的脂蛋白(粘附素)介导细胞间的粘附。粘附素也是一种抗原。
感染肺炎支原体后1周可出现IgM和IgA型抗体,数周后可出现IgG抗体滴度升高,并持续数月。抗肺炎支原体可与其它支原体属发生交叉反应。在鉴别诊断时,须排除肺炎衣原体感染、病毒性肺炎、鹦鹉热和Q热。抗肺炎支原体特异的IgM抗体最早可在发病1周左右出现,可持续存在3-6个月。
7、副流感病毒
副流感病毒分布于世界各地,约35%的儿童和婴幼儿急性呼吸道感染是由副流感病毒所引起的。在严重病例中,可引起假义膜性喉炎。在成人中感染副流感病毒可引起上呼吸道疾病,经常伴有发热。副流感病毒感染可呈地方性流行,特别是在晚秋至第二年春天之间。副流感病毒通过气溶胶传播。针对副流感病毒各型的抗体之间有交叉反应,可通过比较抗体滴度进行区分。抗副流感病毒特异的IgM抗体最早可在发病1周左右出现,可持续存在2-3个月。
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