肺结核患者定期查痰的重要意义及检测方法

肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种呼吸系统传染病，主要由含菌的飞沫通过呼吸道传播。因此，肺结核患者痰液中常含有一定的结核分支杆菌，通过查痰可及时发现，对肺结核的诊断、治疗及预后均有重要意义。

临床上常用的检测结核分支杆菌的方法有以下几种：

涂片染色

包括萋尼氏染色和荧光染色法，价格10-20元/次。优点：经济、简单、快速、易行，缺点：①阳性率约为25%-30%，灵敏度为排菌量-条/ml可检测出阳性；②特异性差，不能区分结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和其他分枝杆菌；③无法区别死菌与活菌：临床上可能存在涂阳培阴。涂片阴性不可轻易排除结核。荧光染色法阳性率较萋尼氏染色高10.%，较快速，但假阳性率较高、保存时间短是缺点。镜检应在染色后24H内进行，如需放置较长时间后镜检，应将涂片放置于4℃保存，及时镜检。

分枝杆菌培养(慢培)

又叫固体培养基、改良罗氏法，价格元。是国际公认的结核病诊断金标准，条菌/毫升标本可检出，可进一步进行菌种鉴定和药敏试验，可检出70-80％的结核病患者。缺点是检测周期长，培养阳性平均报告时间27-31天，阴性56天；药敏报告时间28天。临床报告时间平均天。

液体培养（快培）

价格元。优点：分枝杆菌生长更好；比固体培养基的阳性率更高(15-30%)；对非肺部样本和涂片阴性样本,其检出率更高；报告时间更快(12-14天)；更好和更快的药敏试验结果(6-12天)。局限性是需要做NALC-NaOH痰处理和离心，价格偏高。临床报告时间平均45天。

聚合酶链反应（PCR）

可以检测痰、体液标本，敏感性高，但假阳性率高也高，需结合临床来综合判断。临床报告时间平均3-5天。

实时荧光定量PCR(GeneXpertMTB/RIF)

GeneXpertMTB/RIF可同时完成MTB定性及利福平耐药(rpoB)基因检测，全部检测过程仅需分钟直接检测痰、体液、BALF、组织等标本。文献报道通过结合GeneXpertMTB/RIF检测，新发PTB患者菌阳比例由年的45%提升到年的70%。因此WHO推荐所有包含孕妇在内的成人及儿童尤其怀疑耐药患者均应接受XpertMTB/RIF进行定性诊断及RFP耐药性检测。临床报告时间平均3-5天。

线性探针（Hain）

其原理是检测异烟肼的耐药基因KatG，InhA和利福平的耐药基因rpoB来判断MTB对异烟肼、利福平的耐药性。目前，线性探针杂交技术和液体培养法检测异烟肼和利福平的药敏试验的方法已被WHO推荐为一线抗结核药药敏试验的金标准。该检测技术主要是适用于痰涂片抗酸染色阳性的标本，是目前WHO推荐的检测MDR-TB的工具之一，我国院已开展该检测方法。大部分的标本在24-48小时内报告结果。文献报道了这种方法检测利福平、异烟肼耐药的敏感度、特异度分别为87.6%和99.2%。线性探针杂交在临床上已广泛应用，该技术能快速检测MGIT培养基内MTB的耐药基因，其检测结果与DNA基因测序的结果的符合率为%。但是其操作过程中不能自动化出结果需人工读取结果也是其重要的缺点。临床报告时间平均3-5天。

痰分枝杆菌检测在肺结核治疗疗效评价中具有相当重要的意义。初治肺结核在治疗前、治疗2、5、6月末，复治肺结核患者在治疗前、治疗2、5、8月末应查痰结核分枝杆菌（包括涂片和/或培养，必要时行分子生物学方法检测）。临床医生经过综合评价后对治疗方案进行疗效评价，必要时调整治疗方案或停药。